人結腸癌細胞株凍存的原則是要逐步緩慢降溫

　　部分細胞在運輸過程中，人結腸癌細胞株由于不斷震蕩及環境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養基培養或者傳代至新瓶中培養即可；懸浮細胞可以離心（1000rpm，3min）收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養基重懸并接種細胞。
　　人結腸癌細胞株凍存的原則是要逐步緩慢降溫，以避免細胞內部形成冰晶對細胞造成傷害。
　　1) 貼壁細胞經消化、離心收集，懸浮細胞經離心收集；
　　2) 大約106個細胞加入1ml凍存液（細胞培養液和10%DMSO），用吸管吹打，使細胞分散成單細胞懸液；
　　3) 加入到凍存管中。如用1.8ml的凍存管，每管不要加入超過1.5ml的細胞懸液；
　　4) 在凍存管上標明細胞名稱及凍存日期；
　　5) 用厚布或衛生紙包裹凍存管，置于4℃半小時，然后置于-20℃兩小時，再置于-40℃兩小時，然后置于液氮上方置夜；第二天將細胞置于液氮中；如果僅想提取細胞內的東西可以直接放在-20度的冰箱中。
　　6) 記下凍存管存放的位置，作好凍存記錄。
　　人結腸癌細胞株注意事項：
　　1、觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B請在10X或20X物鏡下。
　　2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基，細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
　　3、有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。
　　4、收到細胞后，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們。
　　人結腸癌細胞株是一種成團、貼壁生長的細胞,如果狀態好的情況下,生長非常快，細胞形態是不太規則的三角形.在低濃度時，此細胞長梭型（不好描述），高濃度時長成一張地毯，后者才是狀態好的。